发信人: netbuggie (中原一点虫), 信区: Biology
标 题: Re: 问题：关于RNase
发信站: The unknown SPACE (Wed Jul 12 17:07:07 2000), 站内信件

我的体会是只要你不向tube里吐口水,一般没有那麽厉害,用不着谈虎色变.
分离RNA的试剂里多有强变性剂如胍盐,酚等,所以这种情况下RNase也就多
被变性失活的说.最要紧的是你的储备溶液,用于溶解RNA的水,T.E., 用于
NORTHERN的STOCK等,要保持干净.玻璃器皿可在200C左右烤三小时再用.RNA
专用的药品,试剂要分藏.水用DEPC处理O/N,STIR,灭菌20MIN.TRIS要和DEPC
反应,所以要在灭菌破坏DEPC后加入.DEPC强烈致爱,你就自己看着办吧.
RNasin是RNase的抑制蛋白,但温度升高后会解离.
所有的操作要戴手套,小心谨慎.所有的试剂都要分装使用,用过一段时间就
扔掉.一般公司的试剂和用具都比较可信.

【 在 warrior (不死鸟) 的大作中提到: 】
: as I know ,there is no easy way to do so, RNase is the protein
: which is used to prove the primary structure determine the tertiary
: structure, if denatured by heating, it can refold, but this is in
: a accurately controled condition, so autoclave adn DEPC together
: is ok,I am also interested whether there is other better method.
: 【 在 bioyy (在太平洋上狗刨。。。) 的大作中提到: 】
: : 在做分子实验时很讨厌RNase,可是却号称是无处不在的。
: : 请问：
: : 如何简单的使它失活(咱们用DEPC浸泡过夜后autoclave)
: : 其分子中是否有disulfal bond, 为其活性所必需
: : (这样就可以用DTT啦)
: : 听说把它加热煮开，然后冷却，活性又会恢复，有这回事吗？
: : 谢谢。


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※ 来源:．The unknown SPACE bbs.mit.edu．[FROM: 129.59.237.132]