发信人: Ras (很颓的猪。), 信区: Biology
标 题: Re: 请教关于western blotting的问题
发信站: The unknown SPACE (Thu May 23 11:21:40 2002), 转信

第一种配比的情况你重复过几次？
如果只是一次的话，我很怀疑是你实验过程中的其它error导致没有detectable band的。

一二及抗体的比完全取决于抗体的sensitivity, 不能一概而轮。
偶用AP system的时候一及1:100-1000, 二及1:7500.
ECL system的时候一及1:100-1000, 二及1:2000-5000.


【 在 special (xxxx) 的大作中提到: 】
: 电泳时蛋白上样量为50ug/ml,一级抗体为10ul:1mlTBS，二级抗体2ul:1mlTBS,结果带没有
: 显示出来。随后改为一级抗体为15ul:1mlTBS，二级抗体15ul:1mlTBS,带清晰可见。我想
: 问一下，平时大家做western blotting时，1，2级抗体都是用多少倍比？抗体的倍比同蛋
: 白上样量的关系如何？


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一年老一年，一日没一日，
一秋又一秋，一辈催一辈，
一聚一离别，一喜一伤悲。
一榻一身卧，一生一梦里。
寻一夥相识，他一会咱一会，都一般相知，
吹一回，唱一回。

※ 来源:．The unknown SPACE bbs.mit.edu．[FROM: 152.3.117.238]