发信人: labtec (大嘴), 信区: Biology
标 题: Re: western blotting杂带太多怎么办？
发信站: The unknown SPACE (Wed Jul 3 20:08:20 2002) WWW-POST

【 在 special (xxxx) 的大作中提到: 】
: 都找不到我要的带了

可以试着降低二抗稀释倍数.我曾经在用一个抗体时遇到过同样的问题, 当把protein A从
1:3000 dilution 降到1:5000后就只有一条很清楚的带了.提高特异性的办法还有: 适当
增加一抗incubation时间, 洗膜的时候条件剧烈一些, 二抗中加一些牛奶,etc. (如果你
不想换抗体, 也不愿意纯化抗体的话.) 需要注意的是提高特异性的同时很有可能一牺牲
信号强度为代价, 需要大大增加曝光时间.


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※ 来源:．The unknown SPACE bbs.mit.edu．[FROM: 129.98.122.253]