发信人: magie (*^*), 信区: Biology
标 题: Re: expression of actin in E.coli?
发信站: Unknown Space - 未名空间 (Fri Feb 20 00:12:11 2004) WWW-POST

我觉得有一下几个原因不用E。COLI
1。 一般的E。COLI细菌用的CODON PREFERENCE可能与MAMALIAN CELL不同，所以你用普通
的BL21的话可能蛋白根本不表达，但是这点可以克服，你可以用那种加入了RARE CODON的
CELL LINE，比如ROSETTA GEMI系列。

2。有一些MAMALIAN PROTEIN是需要表达后修饰才有活性的，而E。COLI可能无法提供这种
环境。

3。但是也有很多人用E。COLI表达真和生物蛋白，有时也能成功，但YEAST其实是一种挺
好的表达环境，比在FLY，或者作细胞培养方便多了。

所以建议你试一下用E。COLI，不行的话想办法提高YEAST中的产量。至少我知道不同培养
液对E。COLI表达量影响很大，可能你也可以换其他培养夜养YEAST。

【 在 sunnyday (飞鸟) 的大作中提到: 】
: 我们都是用yeast 来表达actin的, 我问过我的老板
: 为什么不用E.coli, 他也说不清,只是说他只知道可以
: 用yeast , Ecoli没听说过.可是用yeast 很麻烦,
: 产量奇低不说,还得很费神的和yeast 本身的actin 分离开.
: 这里有谁知道为什么不能用E.coli express actin么?
: 谢谢!
:
:


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