发信人: twed (灌水技术人员), 信区: Biology
标 题: Re: 如何鉴定Floating Cells是不是进入Cell Death?
发信站: Unknown Space - 未名空间 (Sun May 30 18:00:52 2004) WWW-POST

如果8小时还没有附着的话，细胞肯定死了
不知道你的floating cells多不多，占多大比例？如果数目很少的话western,ladder根本
无法解决问题
我目前也在做这方面的研究，我通常使用flow cytometer来检测subG1或caspase,
但也需要有一定数量的细胞，fibrobalst实际上很容易培养的，你研究中出现的现象我也
遇到过，认为很可能是trypsin处理过头了，如果附着细胞还有不少，你可以把浮游的去
掉，继续培养剩下的细胞。
【 在 worryless (无忧) 的大作中提到: 】
: I trypsinize my fibroblast cells and plate them in serum-free media on
: fibronetin-coated wells,
: 8小时后，不少细胞attach，但是也有不少细胞仍然floating。
:
请问如何鉴定这些floating的细胞仅仅是floating而没有dying，还是它们已经进入cell
: death了？
: 我知道对於已经attach在cover slip上的细胞，
: 你可以用immunofluorescence做caspase或tunel staining来判断该细胞是否正在死亡
，
: 但是对於floating的细胞，不知道应该使用什么方法来鉴定细胞是否正在死亡。
: 我知道trypan blue可以用来鉴定细胞是死(dead)是活(live)，
: 但是不知道是不是可以用trypan blue来鉴定正在死亡的细胞？
:
: 谢谢大家！
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