发信人: lylyshi (小虫动), 信区: Biology
标 题: Re: 问个anneal linker的小问题
发信站: Unknown Space - 未名空间 (Mon Nov 8 19:13:30 2004), 转信
我就用水溶解,连起来也没问题。
25uM working concentration for each one, boil at 100 degree for 5 minutes,
let it cool naturally.
Tried at least 5 times.
【 在 victorjenny (victor) 的大作中提到: 】
: 我的经验和你说的不一样啊。
: 我以前anneal以后直接用来做连接,从来没有问题。而且anneal过程中我没有加过kinase
: ,倒是加了kinase buffer.
: 【 在 ArieHaan (汉) 的大作中提到: 】
: : 合成的oligo都是去磷酸化的,annealing以后需要用kinase磷酸化, 才能插入载体。
: 5'p
: end. I
: 我以前anneal以后直接用来做连接,从来没有问题。而且anneal过程中我没有加过kinase
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.-. __ _ .-. 你我约定难过的往事不许提 也答应永远都不让对方担心
| ` / \ | 要做快乐的自己 照顾自己 就算某天一个人孤寂
/ '.()--\ 你我约定一争吵很快要喊停 也说好没有秘密彼此很透明
| '._/ 我会好好的爱你 傻傻爱你 不去计较公平不公平
_| O _ O |_
=\ '-' /=
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