发信人: royluo ( 罗马情结), 信区: Biology
标 题: 生命之初---CSH小鼠分子胚胎课侧记（四）
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 4 21:15:40 2006), 转信


　本文献给YL

（四）基本功

　　六月七号的早上，整个课程正式开始。每天的安排都是早上由一个教授做三个小时
的讲座，下午做实验，然后晚上又是一个教授做三小时的讲座。六月七号早上的报告是
主讲老师Blanche Capel做的，主要是介绍小鼠做为实验模型动物的历史，以及小鼠遗
传学的基本知识。这个课程主要涉及小鼠的发育，遗传上的东西谈的比较少，算是一个
不足之处。Blanche的报告比较系统，介绍起来会颇费笔墨，所以我想推迟到以后的连
载中来仔细讨论。首先介绍一下六月七号第一天的实验课所教的一些基本技能。

　　万事开头难，要想把小鼠实验做好了，需要会一些基本功。首先一个问题是怎么避
免老鼠咬你。按照主讲老师Blanche的说法就是“you have to feel comfortable with
mice before mice feel comfortable with you”。这个说法是很有道理的。实验室
用鼠本来就是从宠物鼠繁殖而来，性情比较温和，只要不去猛烈刺激它，它就不会咬
你。如果处理老鼠的时候有足够信心，动作就不会很笨拙，这样老鼠就不会因为紧张而
乱咬。 避免刺激老鼠的一个诀窍是让老鼠的两个前爪有东西可抓。如果把老鼠放在平
滑的桌面上，老鼠就会挣扎得很厉害，很难控制。要想控制好老鼠，最好的办法是在拽
住尾巴把老鼠拖出来之后，立即把老鼠放在鼠笼铁盖上，让老鼠两个前爪抓住盖子的铁
条。如果必须得在实验台上操作，最好垫一层质地粗糙的纸巾，把老鼠放在上面。当然
说起来很简单，如果没有经验的话，一开始跟小鼠打交道还是很狼狈的。上这个课之前，
我动物实验的经验基本为零，只做过裸鼠的一些简单试验。裸鼠的牙齿比较弱，所以跟
裸鼠打交道，我从来不怕被咬。正常的老鼠咬起人来就厉害多了。在这个课程中我多次
被老鼠咬，不过运气好只是咬破手套而已。

　 实验课里面我学到的第二个基本功是杀老鼠。课程老师都是爱鼠之人，在课程里面
反复强调要人道对待小鼠，不能给小鼠带来太多痛苦。处死老鼠的办法有很多种，最人
道的办法是头颈脱臼处死法(cervical dislocation)。也有人用断头台砍头处死，或者
是用CO2闷死老鼠（比如我所在的学校）。具体的方法操作起来很简单，让左手大拇指
和食指顶在老鼠脑后把老鼠压住，然后右手拽住老鼠尾巴根部用力往后拉，让老鼠的脊
椎和大脑迅速断开。脊椎和大脑断开的时候，压在老鼠脑后的手指可以感觉得出来。处
死之后，老鼠有时候还会有挣扎，但往往是条件反射。测试老鼠是否已经死亡的办法，
是用手轻碰老鼠的后爪，如果老鼠还有反应，说明还没死。课程一开始的时候，很多女
生杀老鼠都有问题，不太敢用手指按住老鼠，而是用镊子之类的工具。我觉得这样做法
不是很合适，因为没法确定是否真的脱臼了。 如果你从来没有用这种办法杀过老鼠，
最好先处死一只被麻醉的老鼠，弄清楚老鼠头颈脱臼的手感，这样再杀老鼠的时候就知
道该用多大力气了。否则力气太小，弄不死老鼠，力气太大又可能弄得血肉模糊，甚至
把老鼠整个头部给扯下来。

　　第一天实验教的第三个基本功是腹腔注射（intraperitoneal injection），简称
IP injection。对我们来说，IP injection非常重要，因为很多实验都是所谓的存活手
术（survival surgery），需要麻醉小鼠，而一般用IP injection 来导入麻醉剂。IP
injection的第一步是要把老鼠束缚住，露出腹部。正确的做法是用左手的大拇指和食指
牢牢的捏住老鼠颈背处（scruff），让老鼠不能转过头来咬你，然后右手拉住老鼠尾巴，
让老鼠面朝上整个身体绷紧，然后左手小指和无名指按住老鼠尾巴根部。这样一只手就可
以让老鼠动弹不得。大家可能意识到一个问题：小鼠的四肢没有被固定住，万一注射的时
候小鼠四肢乱动怎么办啊？事实上，小鼠一旦发现自己头部不能转动，会自觉变得非常平
静，四肢不会有任何动作。这是一个很有意思的现象，有人说是装死，但我觉得更有可能
是一种自然的条件反射。因为很多哺乳动物母兽转移幼兽的时候，是用嘴叼住幼兽的颈背
的，这个时候幼兽就会自觉的停止挣扎。上这个课之前我也在裸鼠上做过IP injection，
但总要花很大力气，因为固定的不好，小鼠头可以转动，以至于下肢乱动，有时候竟然会
踢掉针头。所以束缚住老鼠的头部是关键中的关键。固定住老鼠之后，下一步就是扎针。
扎针点可以选小鼠腹面中线上，从尾部到头部的第一对和第二对乳头之间的位置。针头应
该朝向小鼠头部，倾斜二三十度角插入小鼠腹腔。这个位置斜插比较理想，因为即碰不到
胸腔，也碰不到腹腔最主要的脏器，最坏的情况也就是扎到肠子罢了，对老鼠影响不大。
另外我习惯把整个针头都插入，这样确保不仅穿透皮肤也穿透了肌肉层。否则的话，注射
的地方会出现一个大包，还得重来。


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